zymoresearch D4004說(shuō)明書(shū)
亮點(diǎn)
清潔并濃縮高達(dá)5微克的DNA≥ 用0µl洗滌殘?jiān)?分鐘內(nèi)洗脫6µl。
柱設(shè)計(jì)允許DNA以高濃度洗脫到最小體積的水或TE緩沖液中。
洗脫DNA非常適合用于PCR、DNA測(cè)序、DNA連接、核酸內(nèi)切酶消化、RNA轉(zhuǎn)錄、放射性標(biāo)記、陣列等。
描述
DNA Clean&Concentrator-5是一種PCR純化試劑盒，可從PCR、核酸內(nèi)切酶消化、DNA修飾反應(yīng)、同位素/熒光標(biāo)記反應(yīng)等中純化高達(dá)5µg的DNA。該產(chǎn)品有助于去除DNA聚合酶、修飾酶、RNA聚合酶、連接酶、激酶、核酸酶、磷酸酶、，和限制性?xún)?nèi)切酶，以及游離dNTPs及其類(lèi)似物，包括放射性標(biāo)記和熒光衍生物。洗脫DNA適用于PCR、陣列、連接、測(cè)序等。
耐洗滌劑性≤5%Triton X-100，≤5%吐溫-20，≤5%沙可西，≤0.1%十二烷基硫酸鈉
洗脫體積≥ 6微升
設(shè)備微量離心機(jī)
純度A260/A280>1.8
來(lái)自PCR、核酸內(nèi)切酶消化、DNA修飾反應(yīng)、同位素/熒光標(biāo)記反應(yīng)等的樣本源DNA。
大小范圍為50 bp至23 kb
產(chǎn)量≤ 可回收5微克總DNA。對(duì)于50bp至10kb的DNA，回收率為70-95%。對(duì)于11kb到23kb的DNA，回收率為50-70%。
問(wèn)題1：有上限和無(wú)上限有什么區(qū)別？
區(qū)別是帽子。列之間的所有其他內(nèi)容（最大容量、列矩陣等）都是相同的。不確定使用哪一個(gè)？這主要取決于偏好。有些人喜歡有蓋的色譜柱，以便于標(biāo)記或增加安全性，而另一些人喜歡無(wú)蓋色譜柱，以加快樣品處理。
問(wèn)題2：DNA樣本的最小輸入量是多少？
使用低于50µl的體積可能會(huì)導(dǎo)致回收率降低。Zymo研究建議用水將起始體積提高到100µl，以確保最佳結(jié)合條件。
問(wèn)題3：可以重新加載多少次列？
Zymo Research建議重新加載色譜柱不超過(guò)5次，因?yàn)榻壎ㄐ士赡軙?huì)降低。
問(wèn)題4：如果柱上裝載的DNA超過(guò)規(guī)定的最大結(jié)合容量，會(huì)發(fā)生什么情況？
由于硅膠基質(zhì)堵塞，色譜柱過(guò)飽和可能導(dǎo)致DNA總損失。
問(wèn)題5：如何處理儲(chǔ)存在DNA/RNA的裸DNA？
向樣品中加入等量的乙醇（95-100%），并充分混合。樣品已準(zhǔn)備好結(jié)合，不需要DNA結(jié)合緩沖液。繼續(xù)執(zhí)行步驟2。
問(wèn)題6：可以回收的DNA的下限和最小量是多少？
皮克級(jí)的DNA可以恢復(fù)。該限制基于檢測(cè)方法的靈敏度。
問(wèn)題7：如果在開(kāi)始之前沒(méi)有向DNA清洗緩沖液中添加乙醇，我該怎么辦？
在清洗步驟中，DNA將從柱上洗脫。使用適當(dāng)量的DNA結(jié)合緩沖液重新綁定樣本，并使用適當(dāng)制備的洗滌緩沖液清洗柱。
