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zymoresearch D4004說(shuō)明書(shū)

 更新時(shí)間:2022-02-23 點(diǎn)擊量:1693



zymoresearch D4004說(shuō)明書(shū)

DNA Clean & Concentrator-5

亮點(diǎn)

清潔并濃縮高達(dá)5微克的DNA≥ 用0µl洗滌殘?jiān)?分鐘內(nèi)洗脫6µl。

柱設(shè)計(jì)允許DNA以高濃度洗脫到最小體積的水或TE緩沖液中。

洗脫DNA非常適合用于PCR、DNA測(cè)序、DNA連接、核酸內(nèi)切酶消化、RNA轉(zhuǎn)錄、放射性標(biāo)記、陣列等。

描述

DNA Clean&Concentrator-5是一種PCR純化試劑盒,可從PCR、核酸內(nèi)切酶消化、DNA修飾反應(yīng)、同位素/熒光標(biāo)記反應(yīng)等中純化高達(dá)5µg的DNA。該產(chǎn)品有助于去除DNA聚合酶、修飾酶、RNA聚合酶、連接酶、激酶、核酸酶、磷酸酶、,和限制性?xún)?nèi)切酶,以及游離dNTPs及其類(lèi)似物,包括放射性標(biāo)記和熒光衍生物。洗脫DNA適用于PCR、陣列、連接、測(cè)序等。


耐洗滌劑性≤5%Triton X-100,≤5%吐溫-20,≤5%沙可西,≤0.1%十二烷基硫酸鈉

洗脫體積≥ 6微升

設(shè)備微量離心機(jī)

純度A260/A280>1.8

來(lái)自PCR、核酸內(nèi)切酶消化、DNA修飾反應(yīng)、同位素/熒光標(biāo)記反應(yīng)等的樣本源DNA。

大小范圍為50 bp至23 kb

產(chǎn)量≤ 可回收5微克總DNA。對(duì)于50bp至10kb的DNA,回收率為70-95%。對(duì)于11kb到23kb的DNA,回收率為50-70%。


問(wèn)題1:有上限和無(wú)上限有什么區(qū)別?

區(qū)別是帽子。列之間的所有其他內(nèi)容(最大容量、列矩陣等)都是相同的。不確定使用哪一個(gè)?這主要取決于偏好。有些人喜歡有蓋的色譜柱,以便于標(biāo)記或增加安全性,而另一些人喜歡無(wú)蓋色譜柱,以加快樣品處理。

問(wèn)題2:DNA樣本的最小輸入量是多少?

使用低于50µl的體積可能會(huì)導(dǎo)致回收率降低。Zymo研究建議用水將起始體積提高到100µl,以確保最佳結(jié)合條件。

問(wèn)題3:可以重新加載多少次列?

Zymo Research建議重新加載色譜柱不超過(guò)5次,因?yàn)榻壎ㄐ士赡軙?huì)降低。

問(wèn)題4:如果柱上裝載的DNA超過(guò)規(guī)定的最大結(jié)合容量,會(huì)發(fā)生什么情況?

由于硅膠基質(zhì)堵塞,色譜柱過(guò)飽和可能導(dǎo)致DNA總損失。

問(wèn)題5:如何處理儲(chǔ)存在DNA/RNA的裸DNA?

向樣品中加入等量的乙醇(95-100%),并充分混合。樣品已準(zhǔn)備好結(jié)合,不需要DNA結(jié)合緩沖液。繼續(xù)執(zhí)行步驟2。

問(wèn)題6:可以回收的DNA的下限和最小量是多少?

皮克級(jí)的DNA可以恢復(fù)。該限制基于檢測(cè)方法的靈敏度。

問(wèn)題7:如果在開(kāi)始之前沒(méi)有向DNA清洗緩沖液中添加乙醇,我該怎么辦?

在清洗步驟中,DNA將從柱上洗脫。使用適當(dāng)量的DNA結(jié)合緩沖液重新綁定樣本,并使用適當(dāng)制備的洗滌緩沖液清洗柱。



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