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Haematologic HCIX-0040說明書

 發(fā)布時間:2018/10/15 點擊量:405

Haematologic HCIX-0040說明書

HTI HCIX-0040

 

Haematologic Technologies,Inc。(HTI)是一家ISO 9001:2015注冊公司,是一家專業(yè)從事體外研究用高質(zhì)量血漿蛋白分離和表征的主要制造商。HTI的重點是凝血級聯(lián)中涉及的蛋白質(zhì),以及骨代謝的調(diào)節(jié)。HTI產(chǎn)品系列包括超過150種高度純化和充分表征的蛋白質(zhì),包括酶原,酶,輔因子和抑制劑,以及單克隆和多克隆抗體的互補系列。還可提供因子缺乏的等離子體和定制的血液采集管,用于臨床研究。提供的服務(wù)包括定制蛋白質(zhì)純化,蛋白質(zhì)修飾,化驗開發(fā),合同制造和合同研究。

 

Haematologic HCIX-0040說明書

 

Coagulation Factor IX

凝血因子IX

 

 

  •  

HCIX-0040 人因IX

 

  •  

尺寸

100微克

公式

50%甘油/水(v / v)

  •  

存儲

-20℃下

純度

通過SDS-PAGE> 95%

  •  

活動決定

凝血試驗

保質(zhì)期(妥善保存)

12個月

  •  
  •  

 BCIX-1040 牛因子IX 

  •  

尺寸

100微克

公式

50%甘油/水(v / v)

  •  

存儲

-20℃下

純度

通過SDS-PAGE> 95%

  •  

活動決定

凝血試驗

保質(zhì)期(妥善保存)

12個月

  •  

 

酶原因子IX是單鏈維生素K依賴性糖蛋白,其在肝臟中合成(1-3)。因子IX的結(jié)構(gòu)域結(jié)構(gòu)類似于其他維生素K依賴性凝血因子的結(jié)構(gòu)域結(jié)構(gòu)。NH 2 - 末端區(qū)域含有12個γ-羧基谷氨酸(gla)殘基,其促進因子IX與帶負電荷的磷脂表面的鈣依賴性結(jié)合。與表皮生長因子(EGF)同源的兩個結(jié)構(gòu)域跨越NH2-末端gla結(jié)構(gòu)域和活化肽(Ala-146至Arg-180)之間的區(qū)域。

因子IX由因子XIa或因子VIIa /組織因子/磷脂復(fù)合物激活。位點A處的切割(參見圖)產(chǎn)生中間體IXa,其隨后通過在位點B處的切割而轉(zhuǎn)化為*活性形式IXaβ.NH2-末端輕鏈(GLA和EGF結(jié)構(gòu)域)保持共價連接至COOH-末端重鏈。通過二硫鍵。絲氨酸蛋白酶催化三聯(lián)體(Ser-365,His 221,Asp-269)位于重鏈中。因子IXaβ是“內(nèi)因子Xase復(fù)合物”(因子VIIIa / IXa / Ca2 + /磷脂)的催化組分,其將因子X蛋白水解活化為因子Xa。

通過常規(guī)方法(4)和免疫親和層析(5)的組合從新鮮冷凍血漿制備人因子IX。通過Fujikawa等人描述的方法的改進,從新鮮的檸檬酸化牛血漿制備牛因子IX。(6)。純化的蛋白質(zhì)以50%(vol / vol)甘油/ H2O提供,應(yīng)儲存在-20oC。通過SDS-PAGE分析確定純度,并使用因子IX凝固測定法測量活性。

 

凝膠

Novex 4-12%Bis-Tris

加載

人因子IX,每泳道1μg

緩沖

MOPS

標準

SeeBluePlus 2; 肌球蛋白(191 kDa),磷酸化酶B(97 kDa),BSA(64 kDa),谷氨酸脫氫酶(51 kDa),酒精脫氫酶(39 kDa),碳酸酐酶(28 kDa),肌紅蛋白紅(19 kDa),溶菌酶(14 kDa的)

 

本土化

等離子體

血漿濃度

4-5ug / ml(人)(1)

行動方式

酶原; 絲氨酸蛋白酶因子IXa的前體

分子量

55,000(人類)(8)
55,400(牛)(6)

消光系數(shù)

Ë

1%

1厘米,280納米

 

= 13.2(人類)(7)

 

 

= 12.0(牛)(6)

 

等電點

4.2-4.5(人類)(7)
3.7(牛)(6)

結(jié)構(gòu)體

單鏈,NH2-末端gla-結(jié)構(gòu)域,兩個EGF結(jié)構(gòu)域

碳水化合物百分比

17%(人類)(7)
26%(牛)(6)

翻譯后修改

一個β-羥基天冬氨酸(9),十二個玻璃殘留物(7)

 

 

  1. Thompson,AR,Blood,67,565(1986)。
  2. Hedner,U。,et al。,In Hemostasis and Thrombosis,2nd edition,ed。RW Colman,J。Hirsh,VJ Marder,EW
  3. 薩爾茲曼,第39-47頁。JP Lippincott Co,費城,1987年。
  4. Fujikawa,K.,Davie,EW。,Methods in Enzymology,45,74(1976)。
  5. Bajaj,SP,et al。,Prep。Biochem。,11,397(1981)。
  6. Jenny,RJ,et al。,Prep。Biochem。,16,227(1986)。
  7. Fujikawa,K。等,Biochemistry,12,4938(1973)。
  8. Discipio,RG等,Biochemistry,16,698(1977)。
  9. Osterud,B.,et al。,J.Biol。Chem。,253,5946(1978)。
  10. McMullen,BA,et al。,BBRC,115,8(1983)。

 

 

 

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